期刊简介

  本学报是由山东省教育厅主管的,由滨州医学院主办的面向国内外发行的综合性医学学术期刊,主要刊登基础医学、临床医学、预防医学、口腔医学、药学及相关领域的新理论、新成果、新方法和新技术等。本刊对刊登稿件注重稿件的科学性、先进性及实用性,论点明确,资料可靠,文字精炼,数字准确。


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  • 杂志名称:滨州医学院学报杂志
  • 主管单位:山东省教育厅
  • 主办单位:滨州医学院
  • 国际刊号:1001-9510
  • 国内刊号:37-1184/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:全国高等医药学院学报质量评比优秀编辑奖(89)期刊收录:国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中)
滨州医学院学报杂志2013年第03期

人RASSF1A基因慢病毒表达载体的构建及鉴定

孔丽君;胡金霞;于媛;庞敏

关键词:RASSF1A基因, 人, 目的载体pLV.Des3d.P/neo, 慢病毒
摘要:目的 应用pLV.Des3d.P/neo 构建人RASSF1A 基因的慢病毒表达载体并对其进行鉴定.方法 采用Oligo核酸软件对Genbank上所发表的RASSF1A序列进行分析,设计一对RASSF1A 基因上下游引物,利用Gateway克隆方法,分别在其两端添加attB重组位点,运用PCR扩增RASSF1A 和IRES/eGFP,将PCR 产物进行BP 反应然后转化到Stbl3感受态菌,通过卡那霉素抗性筛选、PCR 鉴定,选取鉴定正确的pDown-RASSF1A 和pTail- IRES/eGFP 克隆测序.将pDown-RASSF1A和pTail-IRES/eGFP与pLV.EX3d.P/neo混合进行LR 反应,构建慢病毒载体pLV.EX3d.P/neo-EF1A>RASSF1A>IRES/eGFP,再次进行PCR、测序鉴定.结果 成功地构建了hRASSF1A基因的重组慢病毒表达载体pLV.EX3d.P/neo-EF1A>RASSF1A>IRES/eGFP.结论 基因序列克隆正确,为进一步探讨RASSF1A在肿瘤基因治疗中的作用奠定了基础.